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幾種TBS緩沖液配制方法介紹

TBS緩沖液是Tris-HCl緩沖鹽溶液，為等滲鹽溶液加Tris-HCl緩沖液。屬于常規(guī)pH緩沖液，常用于清洗免疫染色的組織或Western?Blot?中的蛋白印跡膜等，是常用分子生物學(xué)試劑。TBS緩沖液(0.05mol/L,pH7.4)主要由Tris、氯化鈉、BSA、防腐劑等組成，可用于免疫金銀染色中清洗組織，亦可作為封閉液的基礎(chǔ)試劑。Tris緩沖鹽水（TBS）：10mmol/L,Tris含0.9%NaCl,用1NHC1調(diào)pH7.4；操作步驟(僅供參考)：1、石蠟切片脫蠟水...

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PDA培養(yǎng)基作用

PDA培養(yǎng)基作用：PDA（PotatoDextroseAgar（Medium））培養(yǎng)基又稱馬鈴薯葡萄糖瓊脂，是一種半合成培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基。宜培養(yǎng)酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。PDA培養(yǎng)基的配制：（僅供參考）(1)稱量和熬煮按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中，加水1000ml，在加熱器上加熱沸騰，維持20-30min，用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾，濾渣棄取。濾液補充水分到1000ml。(2)加熱溶解把濾液放入鍋中，加入葡萄糖20g，瓊脂15～20g(提前搞碎)，...

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果膠酶的使用及提取方法

果膠酶是一種天然的復(fù)合多糖類高分子化學(xué)物，通常包括原果膠酶、果膠甲酯水解酶、果膠酸酶，通過它們的聯(lián)合作用使果膠質(zhì)得以*分解。由黑曲霉經(jīng)發(fā)酵精制而成，適用于果汁榨取、濃縮過濾、果汁澄清、膜組織分離。在食品、醫(yī)藥和日用化學(xué)行業(yè)具有廣泛的用途。果膠酶的作用果膠酶由黑曲霉經(jīng)發(fā)酵精制而得。外觀呈淺黃色粉末狀。果膠酶主要用于果蔬汁飲料及果酒的榨汁及澄清，對分解果膠具有良好的作用。天然的果膠質(zhì)在原果膠酶作用下,轉(zhuǎn)化成水可溶性的果膠；果膠被果膠甲酯水解酶催化去掉甲酯基團,生成果膠酸；果膠酸經(jīng)...

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木瓜蛋白酶的提取方法

木瓜蛋白酶（Papain）簡稱木瓜酶，又稱為木瓜酵素。是利用未成熟的番木瓜（Caricapapaya）果實中的乳汁，采用現(xiàn)代生物工程技術(shù)提煉而成的生物酶制品。木瓜蛋白酶主要作用：食品加工、醫(yī)藥使用、日化洗滌、飼料加工、皮革和紡織等行業(yè)；以未成熟的番木瓜乳液為原料，經(jīng)過生物提取、微濾、冷凍、干燥提煉而成的酶制劑。木瓜蛋白酶的提取方法：（僅供參考）由木瓜的未成熟果實，經(jīng)提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工業(yè)上以粗制品的應(yīng)用為主。木瓜蛋白酶韻生產(chǎn)方法有三種，分別是直接熱風(fēng)烘...

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木瓜蛋白酶活性測定

木瓜蛋白酶（Papain）是一種蛋白水解酶，又稱木瓜酶。是利用未成熟的番木瓜（Caricapapaya）果實中的乳汁，采用現(xiàn)代生物工程技術(shù)提煉而成的生物酶制品。下面來詳細介紹一下木瓜蛋白酶活性測定的方法。木瓜蛋白酶活性測定：（僅供參考）木瓜蛋白酶活性測定原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（底物）水解而釋出N-苯甲酰-L-精氨酸，其釋出量可用氫氧化鈉液滴定，以此確定酶活力。酶活單位在25℃下，每分鐘內(nèi)能催化分解1umol底物的酶量，稱為1單位。試液制備1、底物溶液：準...

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DAB顯色試劑盒（20×）說明書

DAB顯色試劑盒（20×）說明書貨號：DA1010規(guī)格：DA1010-3DA1010-10溶液A3ml10ml溶液B3ml10ml保存：-20℃避光密閉保存，一年有效，避免反復(fù)凍融；短期可2-8℃保存。產(chǎn)品簡介：二氨基聯(lián)苯胺（Diaminobenzidine,DAB）是過氧化物酶（POD）的顯色底物，DAB顯色液主要用于免疫過氧化物酶法，適用于辣根過氧化物酶HRP標(biāo)記的免疫印記或免疫組化反應(yīng)。過氧化物酶催化底物發(fā)生反應(yīng)，于反應(yīng)部位產(chǎn)生棕色沉淀物，免疫印記可直接在膜上顯示條帶；...

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考馬斯亮藍測蛋白質(zhì)方法

蛋白質(zhì)濃度測定的方法有很多，考馬斯亮藍測定蛋白質(zhì)是實驗室常見的一種方式，它利用比色法和色素法混合方法、操作簡便，考馬斯亮藍測蛋白質(zhì)原理：考馬斯亮藍G-250(Coomassie?brilliant?blue?G-250)測定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。該染料在游離狀態(tài)下呈紅色，在稀酸溶液中當(dāng)它與蛋白質(zhì)的疏水區(qū)結(jié)合后變?yōu)榍嗌罢叽蠊馕赵?65nm，后者在595nm在一定蛋白質(zhì)濃度范圍內(nèi)（1-1000μg），蛋白質(zhì)與色素結(jié)合物在595nm波長下的吸光度與蛋白質(zhì)含量成正比，...

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免疫沉淀的具體步驟說明

免疫沉淀是利用抗體特異性反應(yīng)純化富集目的蛋白的一種方法?？贵w與細胞裂解液或表達上清中相應(yīng)的蛋白結(jié)合后，再與蛋白A/G（ProteinA/G）或二抗偶聯(lián)的agarose或Sepharose珠子孵育，通過離心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗體-目的蛋白復(fù)合物，沉淀經(jīng)過洗滌后，重懸于電泳上樣緩沖液，煮沸5-10min，在高溫及還原劑的作用下，抗原與抗體解離，離心收集上清，上清中包括抗體、目的蛋白和少量的雜蛋白。溶液制備緩沖液：50毫米Tris-HClpH7.4；氯化鈉150毫米；1毫...

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