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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心生化檢測(cè)試劑盒-常量法淀粉系列BC4270-50T/48S支鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒

支鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
支鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱
Amylopectin Content Assay Kit
檢測(cè)方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品型號(hào):BC4270-50T/48S

更新時(shí)間:2024-04-15

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1854

服務(wù)熱線

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產(chǎn)品介紹

支鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào):BC4270
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一液體60 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體50 mL×1瓶(自備)2-8℃保存
試劑三液體30 mL×1瓶2-8℃保存
試劑四-2-8℃保存
試劑五液體6 mL×12-8℃保存
試劑六液體10mL×1瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×12-8℃保存
溶液的配制:
  1. 試劑二:*50 mL自備。

  2. 試劑四:提供125 mL空瓶一個(gè);將試劑三:H2O =9 mL:91 mL混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配,2-8保存半年。

  3. 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg支鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無(wú)水乙醇和0.9 mL試劑三,混勻后封口膜封口,沸水浴至溶解,即10 mg/mL的支鏈淀粉,2-8℃保存半年。

產(chǎn)品說明:
支鏈淀粉又稱膠淀粉,一般由幾千個(gè)葡萄糖殘基組成,淀粉中直鏈淀粉和支鏈淀粉的比例和含量對(duì)淀粉產(chǎn)品的加工、物化特性、糊化溫度等有著直接的影響。
支鏈淀粉和碘形成紅紫色絡(luò)合物,利用乙醇分開樣本中的可溶性糖和淀粉,再用碘與其反應(yīng)得到支鏈淀粉含量。

技術(shù)指標(biāo):
低檢出限:0.0044 mg/mL
線性范圍:0.0125-0.5 mg/mL
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、天平、臺(tái)式離心機(jī)、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、*、無(wú)水乙醇、EP管。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
 
  1. 稱取0.005g烘干樣本,加入1mL試劑一,充分勻漿;

  2. 80℃水浴提取30min3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀;

  3. 在步驟2沉淀中加入1mL試劑二(*)振蕩 5min;3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀

  4. 在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后3000g,25℃離心5min,取上清待測(cè)。

二、測(cè)定步驟
  1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)雙波長(zhǎng)至530nm755nm,蒸餾水調(diào)零。

  2. 標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋:10 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液用試劑四稀釋至0.5、0.40.2、0.10.05、0.0250.0125 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待測(cè)。

  3. 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表

序號(hào)稀釋前濃度(mg/mL)標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL)試劑四體積(µL)稀釋后濃度(mg/mL)
11010019000.5
20.58002000.4
30.45005000.2
40.25005000.1
50.15005000.05
60.055005000.025
70.0255005000.0125
備注:實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需200µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。
  1. 操作表:(在1.5mL離心管中依次加入下列試劑)

試劑名稱測(cè)定管標(biāo)準(zhǔn)管空白管
樣本(µL)200--
標(biāo)準(zhǔn)溶液(μL-200-
蒸餾水(µL)--200
試劑五(µL)757575
試劑六(µL)505050
蒸餾水(µL)675675675
充分混勻,測(cè)定530nm和755nm處的吸光值,530nm下的測(cè)定管、標(biāo)準(zhǔn)管、空白管分別記為A測(cè)定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白,755nm下的分別記為A’測(cè)定、A’標(biāo)準(zhǔn)、A’空白,計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A空白)-A’測(cè)定-A’空白),ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)-A’標(biāo)準(zhǔn)-A’空白)。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測(cè)定1-2次。
三、支鏈淀粉含量計(jì)算
  1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

以支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為x軸x,mg/mL,標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)的ΔA標(biāo)準(zhǔn)為y軸y,ΔA標(biāo)準(zhǔn),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b,將ΔA測(cè)定帶入方程得到xmg/mL)。
  1. 支鏈淀粉含量(mg/g 質(zhì)量)=x×V樣總÷W=5x÷W

V樣總:加入試劑四體積,5mL;W:樣本質(zhì)量,g。
注意事項(xiàng):
  1. 反應(yīng)后建議在20min內(nèi)檢測(cè)完成防止褪色。

  2. 如果測(cè)定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
  1. 取0.01g紅豆于研缽中研碎,加入1mL試劑一,進(jìn)行樣本處理取上清3倍稀釋后按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A空白)-A’測(cè)定-A’空白)=0.370-0.045-0.233-0.015=0.107,帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7564x-0.0006計(jì)算x=0.1423,按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得:

支鏈淀粉含量(mg/g 質(zhì)量)=5x÷W×3(稀釋倍數(shù))=213.45 mg/g 質(zhì)量。
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC2040/BC2045  β-淀*酶(β-AL)活性檢測(cè)試劑盒
BC0430/BC0435  ADPG焦磷酸化酶(AGP)活性檢測(cè)試劑盒
BC4255/BC4255  淀粉脫分支酶活性檢測(cè)試劑盒
BC4260/BC4265  直鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒

支鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒

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